As Espécies Reativas de Oxigênio (ROS) são subprodutos naturais do metabolismo aeróbico, mas o desequilíbrio entre sua produção e a capacidade antioxidante celular leva ao estresse oxidativo. Na Biosystems, com décadas de histórico no suporte à pesquisa de alta complexidade, entendemos que medir ROS não é apenas quantificar brilho, mas entender a localização celular dessas moléculas.
1. O Desafio da Detecção de ROS em Ensaios Celulares
Moléculas como o radical superóxido (O2-) e o peróxido de hidrogênio (H2O2) são instáveis e possuem vida curta. Leitores de microplacas convencionais oferecem uma média da fluorescência total do poço, o que pode mascarar subpopulações de células sob estresse severo. Para uma análise fidedigna, é necessário o rigor analítico que discutimos na normalização de dados via Dual-Luciferase, garantindo que o sinal detectado seja biologicamente relevante.
2. A Solução Híbrida: Cytation 5
O Cytation 5 é a ferramenta definitiva para o estudo de ROS porque combina a detecção multimodo convencional com microscopia digital automatizada. Isso permite:
- Localização Organelar: Identificar se o acúmulo de ROS está ocorrendo na mitocôndria ou no citosol através de imagem de fluorescência de alta resolução.
- Cinética em Tempo Real: Monitorar a progressão do estresse oxidativo durante horas ou dias, mantendo as condições fisiológicas através do controle de CO2/O2 e temperatura.
- Análise Ratiométrica: Utilizar sensores geneticamente codificados para corrigir variações de volume celular, eliminando erros comuns em monitoramentos cinéticos.
3. Tecnologia de Fluorescência Avançada
Para detectar sinais de ROS, que muitas vezes são tênues, a sensitividade óptica é crucial. O sistema híbrido do Cytation 5 utiliza monocromadores de largura de banda variável para otimizar a detecção de sondas fluorescentes. Este nível de precisão é o mesmo que aplicamos em ensaios de citotoxicidade ADCC/CDC, onde a discriminação entre sinal e ruído define o sucesso do experimento.
4. Automação e Análise de Dados com Gen5
Todo o fluxo de trabalho, desde a captura da imagem até a quantificação de objetos, é gerenciado pelo Software Gen5. Ele transforma imagens complexas em dados numéricos acionáveis, permitindo que o pesquisador visualize o estresse celular enquanto ele acontece, com qualidade de publicação científica.
Leve a Microscopia para dentro do seu Leitor de Placas
O Cytation 5 une o melhor da detecção multimodo à poderosa microscopia digital da Agilent BioTek. Todos os equipamentos são fornecidos sob encomenda com suporte técnico Biosystems.
CONFIGURAR MEU CYTATION 5 FALAR COM ESPECIALISTA NO WHATSAPP SOLICITAR COTAÇÃO TÉCNICA